abcam抗体实验步骤

肃宁县新诺机械厂提供abcam抗体实验步骤。抗体是一类能与抗原特---结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体)，如血型abo型中的抗a和抗b的抗体，和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体，异嗜性抗体，同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体igm和不完全抗体igg等。抗体在---实践中应用甚为广泛。

rna提取法：试剂中的主要成分为gitc和c6h5oh，其中gitc可裂解细胞，促使ribosome的解离，使rna与蛋白质分离，并将rna释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的c6h5oh，而酸性c6h5oh可促使rna进入水相，ap标记的抗抗体离心后可形成水相层和有机层，这样rna与仍留在有机相中的蛋白质和dna分离开。水相层(无色)主要为rna，有机层(黄色)主要为dna和蛋白质。

实验步骤
1、rna的提取；
2、反转录合成cdna；
3、pcr扩增；
4、产物的电泳和结果的测定。
rt-pcr是将rna的反转录(rt)和cdna的聚合酶链式扩增(pcr)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从rna合成 cdna，再以cdna为模板，扩增合成目的片段。rt-pcr可以一步法或两步法的形式进行。在两步法rt-pcr中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒dna是基于染色体dna与质粒dna的变性与复性的差异而达到分离目的。在ph---12.6的碱性条件下，染色体dna的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒dna的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离，当以ph4.8的naac高盐缓冲液去调节其ph至中性时，变性的质粒dna又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体dna不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体dna与不稳定的大分子rna、蛋白质-sds复合物等一起沉淀下来而被除去。

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